Kedves Olvasóim!
Aktuális bejegyzésem az előző havi írásomhoz kapcsolódik, ugyanis a cink felvételéről és sejten belüli eloszlásáról fogok szólni.
Abban a szerencsés helyzetben vagyok a cink kapcsán, hogy rendelkezésemre állnak különböző cinkre többé-kevésbé specifikus fluoreszcens jelölők, melyek segítségével ki tudom mutatni a cink szövetekben, illetve sejtekben való lokalizációját.
Elsőként a cink szöveti eloszlását tanulmányoztam Brassica gyökércsúcsokban a Zinquin elnevezésű festék segítségével. Ezt a fluorofórt (lásd a szerkezeti képletét alább) széles körben alkalmazzák a cink ionok kimutatására állati és növényi mintákban egyaránt. Az alábbi fotókon látható, hogy a külső cink kezelésekkel párhuzamosan nő a festék fluoreszcenciája, és ez a legjelentősebb a főgyökér merisztémájában (piros nyíllal jelölve). A megnyúlási zóna lényegesen lerövidül a cink kezelt gyökerekben, és itt a cink felhalmozás nem jellemző (zöld nyíllal jelölve).
Brassica juncea gyökércsúcsai Zinquin-nel festve
(saját felvételek)
Ezeken a kis nagyítású felvételeken a cink sejteken belüli lokalizációja nem látható. Pedig érdekes a kérdés, hogy a Brassica növények a gyökereiken belül hol raktározzák/hová zárják el a nagy mennyiségű felvett cinket? Az előző havi bejegyzésemben szerepelt, hogy a sejtfal (és a vakuólum) funkcionálhat raktárként cink stressz során. De vajon így van ez a Brassica fajaim esetén is? Kimutatható-e a cink sejtfalakban történő lokalizációja?
Ennek kiderítésére egy másik, jobb minőségű képeket nyújtó mikroszkópos technikát, a konfokális lézer scanning mikroszkópiát alkalmaztuk. A cinket egy másik, zöld színű emissziót eredményező fluorofórral felöltük (ZinPyr), emellett pedig megfestettük a sejtfalakat is a propídium jodid nevű festékkel, ami a halott sejtekben a magot is jelöli vörös színnel.
Az alábbi felvételeken az látszik, hogy a cink elsősorban a sejtfalakban mutatható ki, ezt a zöld és a vörös fluoreszcencia kolokalizációja jelzi narancs színnel.
Brassica gyökércsúcs ZinPyr-rel és
propídium jodiddal festve (saját felvétel)
Brassica gyökércsúcs ZinPyr-rel és
propídium jodiddal festve, nagyobb nagyítással (saját felvétel)
Remélem tetszett az e havi színes bejegyzésem! A következő hónapban ismét jelentkezem!
